Introducción:

La resistencia a los antibióticos es un desafío creciente en la salud pública a nivel mundial. En particular, las infecciones causadas por la bacteria Klebsiella pneumoniae se han vuelto cada vez más difíciles de tratar debido a su capacidad de desarrollar resistencia a múltiples antibióticos. En septiembre de 2022, se aisló una cepa de Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasas y resistente a varios tipos de antibióticos en muestras de orina. Debido a su alta resistencia, se consideró el uso de bacteriófagos como una alternativa para su tratamiento.

Objetivos:

El objetivo de este estudio fue aislar, caracterizar y secuenciar bacteriófagos capaces de lisar cepas de Klebsiella pneumoniae resistentes a antibióticos, y seleccionar aquellos que no posean genes de resistencia a antibióticos ni genes asociados a la lisogenia.

Materiales y Métodos:

Se recolectaron muestras de agua residual de frigoríficos y aguas cloacales cercanas a un hospital para aislar los bacteriófagos de Klebsiella pneumoniae. Los fagos se propagaron en caldo LB-Ca-Mg. Se extrajo el ADN con fenol-cloroformo y se analizó su patrón de restricción utilizando software BioNumerics™ V6. La secuenciación del ADN se realizó con el kit ADN Nextera XT (Illumina). Las secuencias se ensamblaron y se evaluó su calidad con el software FastQ. Se confirmó el ensamblaje del genoma mediante PCR y se predijeron los genes utilizando GeneMark y ORF Finder. Se compararon las secuencias con otros genomas de fagos mediante NCBI blastn.

Resultados:

Se logró aislar un total de 8 fagos altamente específicos para la cepa panresistente de Klebsiella pneumoniae. Todos demostraron tener capacidad de lisar la cepa en medio líquido en un tiempo de 2 horas, obteniendo un título de 10*10 UFP/mL. Cuando se realizaron los cortes con enzimas, se observaron 5 patrones diferentes. El análisis de secuenciación reveló que los fagos seleccionados no poseían genes de resistencia a antibióticos ni genes asociados a la lisogenia.

Discusión / Conclusiones:

Los resultados obtenidos indican que los bacteriófagos específicos aislados en este estudio podrían ser una alternativa prometedora como adyuvantes a la terapia antibiótica en el tratamiento de infecciones causadas por la cepa de Klebsiella pneumoniae resistente a antibióticos. La capacidad de los fagos para destruir selectivamente las bacterias objetivo, sin afectar a las células humanas sanas, y su capacidad de adaptación a las bacterias en constante evolución los convierten en una opción potencialmente efectiva contra las cepas resistentes. Sin embargo, se requieren estudios adicionales para evaluar su eficacia y seguridad en ensayos clínicos y su viabilidad a largo plazo como parte de una estrategia terapéutica sustentable.