Introducción:
Los niveles de resistencia a antirretrovirales en pacientes embarazadas infectadas por HIV en Argentina se encuentran en niveles moderados a altos (particularmente para inhibidores no nucleosídicos de la transcriptasa reversa, INNTR). Estudios previos de nuestro país en muestras pretratamiento de mujeres embarazadas (2008-2014) mostraron una prevalencia de resistencia primaria del 19.5% (15.5% para INNTR). Los niveles de resistencia observados podrían condicionar la eficacia de la profilaxis neonatal, para la cual se dispone históricamente en nuestro medio de 3 drogas: AZT, 3TC y NVP. Teniendo en cuenta que la profilaxis neonatal con NVP se indica en escenarios de mediano y alto riesgo de transmisión vertical, resulta de interés cuantificar las cepas virales que portan mutaciones asociadas resistencia (RAMs) a INNTR en esta población (carga viral mutacional, CVM).
Objetivo:
Evaluar en embarazadas HIV+ naive portadoras de resistencia primaria el porcentaje de cuasiespecies virales con mutaciones asociadas a resistencia a INNTR y determinar la CVM (copias/mL) de las mismas.
Materiales y métodos:
Se realizó un análisis retrospectivo de 42 muestras pretratamiento (2008-2014) de pacientes gestantes HIV+ previamente estudiadas por Trugene. Dichas muestras fueron re-secuenciadas por técnica ultrasensible (Ultra Deep Sequencing , UDS) utilizando un protocolo provisto por la OPS y secuenciador MiSeq Illumina. Las lecturas se analizaron con el software HYDRA el cual informa el porcentaje de cada cuasiespecie, utilizando un filtro de detección del 1%. Las mutaciones para INNTR se identificaron según listado de la OMS, encontrándose 9 mutaciones en 7 muestras (16.6%). La CVM se estimó en muestras que presentaban RAMs a INNTR considerando la carga viral materna al momento del estudio de resistencia y el porcentaje de cuasiepecies con RAMs.
Resultados:
Las mutaciones encontradas fueron K103N (n:4), G190A/E/S (n:3), Y181I (n:1) y P225H (n:1). El 78% de las mutaciones se encontraban presentes en más del 93.5% de la población viral. La CVM fue >1000 copias/mL en el 89% de las mutaciones para INNTR, siendo la mediana de CVM de 8330 (RIC: 7738 – 29796) copias/mL. El porcentaje de cuasiespecies virales que portaban la K103N fue mayor al 97% de la población viral, con una mediana de CVM de 8330 (RIC: 5583-26241) copias/mL. El porcentaje de cuasiespecies con mutaciones en el codón G190 fue del 1.05, 1,25 y 99.7% respectivamente, con una mediana de CVM de 1387 (rango: 89-13281) copias/mL. Para las mutaciones Y181I y P225H los porcentajes fueron en ambas superiores al 93%, siendo las CVM de 2223 y 46276 copias/ml, respectivamente.
Conclusiones:
La tecnología UDS permitió cuantificar la CVM y, aún en RAMs presentes en baja proporción, se puede observar que la CVM fue elevada. En embarazadas HIV+ portadoras de resistencia primaria, las cuasiespecies que presentan RAMs para INNTR (particularmente la K103N) son predominantes dentro de la población viral. Frente a este perfil de resistencia materno, esta evidencia preliminar permitiría predecir que, en recién nacidos en escenarios de mediano o alto riesgo de infección según el consenso SADI 2018, la NVP no debería ser considerada droga útil en la profilaxis neonatal combinada, debiéndose considerar su sustitución por raltegravir.
