Introducción:
La fiebre Chikungunya es una enfermedad viral causada por el virus chikungunya, transmitido por la picadura de un mosquito Aedes aegypti infectado. Durante 2023 se detectó un aumento significativo de los casos en países de Sudamérica y la OPS recomienda fortalecer la capacidad a nivel de laboratorio para detectar el virus de manera oportuna. La identificación por PCR se considera la técnica Gold Standard para el diagnóstico sin embargo, requiere reactivos, equipos y software costosos y complejos. Las pruebas de PCR deben realizarse en instalaciones especializadas, requieren personal altamente capacitado, lo cual restringe la popularización de este método.
Objetivos:
Desarrollar un test simple, rápido, económico y de producción nacional para detectar el virus Chikungunya.
Materiales y Métodos:
Se desarrolló un ensayo colorimétrico de amplificación isotérmica mediada por bucle, un método alternativo a la PCR que funciona a una temperatura fija y no requiere termocicladores, que puede realizarse en tiempos cortos, mostrando resultados precisos y fiables. El método utiliza un solo tubo con cebadores específicos y una solución mix con transcriptasa reversa y ADN polimerasa a la que se adicionan las muestras a ser estudiadas. La lectura se definió como un cambio de color –visible a ojo desnudo-, mediante la adición del colorante HNB (Hydroxy naphthol blue). La sensibilidad y especificidad del LAMP se determinaron analizando muestras remanentes de diagnósticos realizados durante los meses de marzo y abril 2023. Se estudiaron un total de 25 muestras purificadas a partir de suero, 8 casos confirmados de Chikungunya y 17 casos negativos. Se analizaron muestras de otros arbovirus como Dengue, Zika, Fiebre amarilla, virus Mayaro y posibles contaminantes como ADN Humano, bacterias y levaduras.
Resultados:
Se observó una concordancia del 100% entre los resultados de la PCR realtime y el método propuesto. Los resultados mostraron que nuestra prueba es altamente sensible y específica permitiendo así una detección simple y rápida del virus Chikungunya.
Discusión / Conclusiones:
El método desarrollado es específico, sensible y apropiado para ser utilizado como diagnóstico especialmente en hospitales y laboratorios que carecen de equipamiento sofisticado.