Introducción:

KPC y NDM son las carbapenemasas dominantes en Argentina. En 2017, se reporta la primera K. pneumoniae (KPN) ST307 productora de KPC-3 en el país. KPN ST307 es un clon hiperepidémico asociado a determinantes de resistencia como CTX-M-15, KPC-2/3, OXA-48/181, NDM-1 y VIM-1. La coproducción de KPC y NDM emerge en nuestro país durante la pandemia de COVID-19, siendo KPN la especie más frecuente.

Objetivos:

Por esto, nos propusimos reportar el hallazgo de dos aislamientos de KPN ST307 coproductoras de KPC-3 y NDM-1 provenientes de dos hospitales y ciudades

Materiales y Métodos:

La identificación bacteriana de KPN M25910 (hisopo rectal, Nov 2021) y M27284 (sangre, Jun.2021) se realizó por MALDI-TOF. La sensibilidad se evaluó por difusión por disco y/o microdilución y/o tira de gradiente (CLSI/EUCAST). La actividad carbapenemasa se determinó por mCIM/eCIM (CLSI). La CIM de aztreonam (AZT)/avibactam (AVI) se evaluó colocando una tira de AZT en placa de agar MH con 4ug/ml de AVI. La coproducción de KPC y metalo-β-lactamasa (MBL) se evaluó mediante las sinergias de discos entre ceftazidima/avibactam (CZA)/EDTA y AZT/ácido borónico (BOR). Por PCR y secuenciación se confirmaron los genes de resistencia y se determinó el MLST. La relación clonal se evaluó por XbaI-PFGE.

Resultados:

Ambas KPN fueron resistentes a carbapenemes, AZT, amicacina, gentamicina, ciprofloxacina, colistin, CZA (CIM >256 µg/ml) y sensibles a minociclina, tigeciclina, fosfomicina y AZT/AVI (CIM 0,19 µg/ml). mCIM/eCIM fueron indicativas únicamente de serin carbapenemasa. Las sinergias con discos AZT/BOR y CZA/EDTA fueron positivas sugiriendo la coproducción de carbapenemasas de clase A y B. Las PCRs fueron positivas para blaKPC, blaNDM, blaCMY y negativa para mcr-1. Por secuenciación se confirmaron las variantes blaKPC-3, blaNDM-1 y el ST307. Pulsotipos con >7 bandas de diferencia se discriminaron por PFGE.

Discusión / Conclusiones:

Reportamos el hallazgo de dos KPN ST307 productoras de KPC-3 y NDM-1 en Argentina. La detección fenotípica de los dobles productores es compleja y desafiante, por lo que, las sinergias de discos CZA/EDTA y AZT/BOR podrían ser una alternativa de screening de las combinaciones de KPC y MBL cuando no se dispone de PCR y/o inmunocromatografía. La detección del clon hiperepidémico de KPN ST307 productor de KPC-3 y NDM-1 destaca la importancia de la vigilancia epidemiológica para comprender la dinámica y la diseminación de estos mecanismos durante y después de la pandemia de COVID-19.