Introducción:
El síndrome de absceso hepático por Klebsiella pneumoniae (SAHKP) en pacientes sanos de la comunidad es endémico en Asia, aunque en nuestro país los casos reportados son escasos. Se asocia a infecciones metastásicas graves como endoftalmitis, meningitis y fascitis necrotizante. SAHKP es causado por cepas de K. pneumoniae hipervirulentas (Kphv) mayoritariamente asociadas al secuenciotipo ST23, serotipo capsular K1, y en menor medida a ST65, ST375 y ST86, serotipos K2. Éstas presentan plásmidos de gran tamaño (e.g. pLVPK) que portan genes de virulencia que las diferencian de cepas del patotipo clásico (Kpc). La hipermucoviscosidad (HMV) es una característica fenotípica de cepas Kphv, aunque también puede expresarse en Kpc. Inicialmente presentaban amplia sensibilidad a los antimicrobianos, pero están emergiendo cepas multirresistentes.
Objetivos:
El objetivo del trabajo fue la caracterización fenotípica y molecular de aislamientos clínicos de Kp-HMV locales a fin de identificar Kphv.
Materiales y métodos:
Se estudiaron 14 Kp-HMV recolectados en un hospital público de Granadero Baigorria de muestras de orinas, respiratorias, sangre y abscesos hepáticos provenientes de pacientes ambulatorios e internados en el período 2021-22. Un test de filancia positivo (filamento viscoso >=5 mm) se consideró como método de tamizaje de cepas HMV. La identificación y sensibilidad a los antimicrobianos se realizó mediante Vitek2C (Biomérieux). Se investigaron por PCR cuatro genes de virulencia: wzc_K1 y orf10_K2, relacionados al polisacárido capsular K1 y K2, respectivamente; magA, codificante de una proteína asociada a HMV (restringido a K1); y rmpA, codificante de un regulador del fenotipo mucoide. La identidad clonal de los aislamientos se determinó por OD-PCR (PCR empleando oligonucleótidos degenerados) y MLST (Multilocus sequence typing).
Resultados:
2/14 aislamientos, recuperados de absceso hepático y hemocultivo de un mismo paciente, presentaron el gen rmpA y el serotipo K2, y se los designó como Kphv. Ambos presentaron el mismo antibiotipo con resistencia solo a ampicilina. OD-PCR confirmó que eran el mismo clon, y el análisis por MLST lo identificó como ST375. Los restantes 12 aislamientos resultaron negativos para los genes de virulencia estudiados, resultando Kpc. Entre ellos, 3 mostraron multirresistencia.
Discusión / Conclusiones:
En este trabajo se identificó el primer aislamiento de Kphv e HMV ST375-serotipo K2 asociado a SAHKP en nuestra región. La presencia de HMV es un marcador fenotípico de Kphv y puede evaluarse en el laboratorio a través de un ensayo sencillo como el test de filancia, aunque no es exclusivo de este patotipo. Asimismo, en zonas no endémicas como la nuestra, la búsqueda de Kphv debe realizarse sumando además marcadores genéticos, junto a un diagnóstico clínico sugestivo de este tipo de infecciones. Esto permitirá la detección precoz de Kphv (y diferenciarla de una Kpc), alertar sobre la circulación de este patotipo hipervirulento, emergente a nivel global, y prevenir infecciones metastásicas severas.