Introducción:
A pesar del debate actual sobre el papel de la PCR como herramienta de diagnóstico en la Enfermedad de Chagas, en España es una técnica útil para la detección de parásitos en circulación, y en este sentido permite la confirmación de la infección congénita cuando existe una sospecha clínica. Asimismo, en la fase crónica de la infección es la única herramienta que permite monitorizar la parasitemia en menor tiempo y de manera sencilla.
Considerando estos antecedentes, el objetivo de este estudio fue validar la PCR a tiempo real RealStar® Chagas PCR Kit 1.0 en comparación con un sistema de detección de ADN de T. cruzi in-house establecido en el Centro Nacional de Microbiología.
Materiales / Métodos:
Se incluyeron 96 muestras de sangre pre-procesadas con guanidina 6M EDTA 0,2M pH8. Del total de muestras, 68 correspondían a pacientes con enfermedad de Chagas, con clínica de reactivación aguda (13 casos), infección congénita (14 casos) o infección crónica (41 casos). Como controles se analizaron 28 muestras de individuos con ausencia de infección por T. cruzi.
Resultados:
Las 27 muestras de los casos tanto con reactivación aguda como infección congénita fueron positivas mediante la PCR a tiempo real RealStar® Chagas PCR Kit 1.0 como la PCR CNM in-house. Asimismo, las 28 muestras se individuos con ausencia de infección por T. cruzi presentaron resultados negativos para ambas pruebas de PCR. De las 41 muestras de los individuos con infección crónica, 38 presentaron parasitemia detectable, de ellos 32 fueron positivos mediante RealStar® Chagas PCR Kit 1.0.
La sensibilidad de la PCR RealStar® Chagas PCR Kit 1.0 es elevada en la fase aguda. Los resultados obtenidos con las muestras de individuos en fase crónica refleja la dificultad del diagnóstico molecular en fase crónica.
Conclusiones:
Los resultados muestran la idoneidad de la PCR RealStar® Chagas PCR Kit 1.0 para la detección cualitativa del ADN de Trypanosoma cruzi en muestras de sangre, en particular en casos de infección congénita y reactivación aguda.