Objetivos:
Entre las personas con HIV/sida, la histoplasmosis diseminada progresiva (HDP) representa una causa importante de mortalidad. Dado que la detección de antígeno permite un diagnóstico rápido y la instauración de un tratamiento específico, este estudio tuvo como objetivo evaluar el desempeño analítico de un dot blot “in house” que detecta al antígeno de 100 kDa de Histoplasma capsulatum (Hcp100 dot blot) en orina, y compararlo con el de dos kits comerciales, el ensayo de inmunocromatografía de flujo lateral de MiraVista®Diagnostics (LFA-MVD) y el enzimoinmunoensayo Clarus Histoplasma Galactomannan EIA (Clarus HGM, IMMY). Ambos inmunoensayos se basan en la detección del antígeno galactomanano de H. capsulatum en orina.
Materiales y Métodos:
Se analizaron retrospectivamente muestras de orina de 23 individuos con HIV/sida con HDP probada, 13 de individuos con otras enfermedades infecciosas clínicamente similares a la histoplasmosis y 20 de individuos sanos mediante el Hcp100 dot blot, el LFA-MVD y el Clarus HGM. Para el dot blot, se inoculó 1 µl de de orina sobre una membrana de nitrocelulosa. Tras bloquear la membrana, se añadió IgG anti-Hcp100 de ratón como anticuerpo primario e IgG anti-ratón de cabra conjugado con peroxidasa como anticuerpo secundario. Los dots se revelaron mediante electroquimioluminiscencia y se visualizaron con un fotodocumentador. El LFA-MVD y el Clarus HGM se realizaron según las instrucciones del fabricante. Se calcularon la sensibilidad, la especificidad, valor predictivo positivo (VPP), valor predictivo negativo (VPN) y precisión. El presente protocolo fue aprobado por el Comité de Ética del Hospital Posadas (Ref. 260 EMnP0S0/19).
Resultados:
El Hcp100 dot blot mostró mayor sensibilidad (87,0%), especificidad (90,0%) y precisión (92,9%) que el MVD-LFA (73,9%, 78,8% y 76,8%, respectivamente) y el Clarus HGM (78,3%, 90,9% y 85,7%, respectivamente). En la Tabla 1 se muestran las reacciones cruzadas. Es de destacar que uno de los pacientes con tuberculosis, dio positivo el antígeno urinario de H. caspulatum por las tres técnicas ensayadas.
Discusión / Conclusiones:
El Hcp100 dot blot tuvo un alto desempeño analítico y sería una valiosa herramienta de detección para diagnosticar HDP entre los individuos con HIV/sida.