Introducción:

La metodología MALDI-TOF permite la identificación de microorganismos (MO) a partir del cultivo en pocos minutos (m). En bacteriemias reduce los tiempos de identificación (TI) de MO y mejora el manejo del paciente. La identificación directa (ID) a partir de la botella de hemocultivos positivos (HP) representaría una disminución aún mayor en TI, lo que es crítico para instaurar un tratamiento adecuado.

Objetivos:

Evaluar la implementación de dos protocolos para una nueva técnica que permita acortar los TI por ID a partir de las HP, mediante el uso de MALDI-TOF, en comparación con la identificación a partir del crecimiento incipiente en agar chocolate a 35 ºC 5% CO2 a las 4 h (IP).

Materiales y Métodos:

Se estudiaron 79 HP registradas entre marzo y junio de 2023, de pacientes internados en nuestro hospital. Se descartaron aquellos correspondientes a aislamientos polimicrobianos, levaduras y bacilos gram positivos, y se incluyeron aislamientos monomicrobianos de bacilos gram negativos (BN), cocos gram positivos en racimo (CPr) y en cadena (CPc). De cada HP registrada por el equipo BACT/ALERT se tomaron 5 ml, se colocaron en un tubo con gel separador y se centrifugaron 20 m a 3500 rpm. Se colocaron en 2 eppendorfs 1 mL de la interfase en contacto con el gel: P1 con pretratamiento (pt) con 1 mL de agua destilada estéril y reposo de 15 m y P2 sin pt. Se centrifugaron 2 m a 13000 rpm. Se sembró el pellet en cada spot, añadiendo 0,5 uL de ácido fórmico seguido de 1uL de matriz para realizar la identificación por MALDI TOF Vitek® MS‚ bioMérieux. En paralelo, se procesó cada HP por IP. Se calculó el porcentaje de concordancia entre P1 vs IP y P2 vs IP.

Resultados:

Se analizaron un total de 67HP para P1 (33BN, 33CPr y 1CPc) y 41HP para P2 (19BN y 22CPr). La concordancia global fue de 53% (70% BN y 36% CPr) para P1 y 12% (5% BN y 18% CPr) para P2. En los casos discordantes no hubo identificación por ID pero sí por IP, salvo un único caso de un BN anaerobio que fue identificado únicamente por P1. El CPc fue identificado de forma correcta. El tiempo de ID fue de 1 h.

Discusión / Conclusiones:

La técnica de ID por P2 presentó una performance inadecuada y por P1 tuvo un desempeño bajo en CPr pero aceptable para BN, por lo que podría acelerar los TI siendo una alternativa útil para cuando no se dispone de tiempo para trabajar de pátina. Sería necesario seguir evaluando el P1 para ver si mejora la ID de CPr y ampliar el estudio incluyendo otros géneros y especies.