Introducción:
El aumento de la incidencia de las infecciones causadas por Streptococcus agalactiae (EGB), la resistencia a los antimicrobianos, la ausencia de una vacuna y el hecho de que no siempre es posible detectar la portación de EGB orientan el esfuerzo hacia la búsqueda de opciones para controlar y prevenir estas infecciones. Los bacteriofagos son virus que infectan bacterias que pueden integrarse al genoma (profago) o realizar un ciclo lítico, que finaliza con la lisis de la bacteria y la liberación de la progenie fágica mediada por lisinas. Se propone el uso de lisinas como agentes terapéuticos debido a las ventajas que poseen respecto a los antibióticos.
Objetivos:
Caracterizar las lisinas presentes en 10 genomas representativos de EGB en un contexto global (44 lisinas) y realizar el clonado y purificación de manera de evaluar la capacidad lítica frente a EGB.
Materiales y Métodos:
Se realizó el análisis filogenético de las lisinas presentes en los genomas y se las comparó en un contexto global con las depositadas en base de datos. A partir de ello, se eligió una de ellas para el clonado y purificación por métodos convencionales y se probó su actividad mediante ensayos de inhibición de crecimiento y de lisis de la cepa de EGB de la que fue obtenida.
Resultados:
El análisis reveló la distribución de las lisinas en 5 grupos filogenéticos, en cada uno de los cuales se encontraron lisinas de profagos argentinos. De las lisinas provenientes de EGB argentinos analizadas, 9/15 presentaron 90-100% de identidad con lisinas previamente caracterizadas de EGB, mientras que 6 fueron nuevas endolisinas. Se eligió una lisina para el clonado, expresión y se logró purificarla con una pureza mayor al 90%. Los resultados de los ensayos de actividad mostraron tanto la inhibición del crecimiento como la lisis de la cepa de EGB en presencia de la lisina, lo que no ocurrió en el caso de los controles sin lisina.
Discusión / Conclusiones:
Si bien son resultados preliminares, son muy alentadores, siendo el principio de la caracterización de la lisina. Se pretende continuar caracterizando la lisina y evaluar si esta posee actividad contra otros EGB de Argentina. La variedad de lisinas encontradas en nuestra colección de cepas de EGB es alentadora y nos permitirá en el futuro continuar la búsqueda de lisinas con actividad contra EGB circulantes no solo en el país, sino a nivel global.