Introducción:
Los Enterobacterales productoras de carbapenemasas (EPC) se consideran actualmente una problemática global, debido a su resistencia a múltiples fármacos. La elevada prevalencia en nuestro medio de serino carbapenemasas (principalmente KPC), metalo-ß-lactamasas (de tipo NDM) y el surgimiento de cepas doble productoras de carbapenemasa (DPC) a generando un gran desafío, costo y tiempo para su detección por métodos convencionales. Por lo que es necesario la búsqueda y el desarrollo de nuevas técnicas rápidas y diferenciales para realizar un diagnóstico precoz de las infecciones por EPC.
Objetivos:
Evaluar la eficacia de la modificación de la prueba de Carba NP en soporte sólido para detectar y diferenciar los Enterobacterales productores de KPC, MBL y DPC provenientes de aislamientos clínicos.
Materiales y Métodos:
Se evaluaron 20 aislamientos de EPC, incluyendo KPC(n=9), MBL (n=9) y DPC (n=2). El mecanismo de resistencia se definió mediante el uso de métodos fenotípico tradicionales y ensayos de PCR multiplex (blaNDM, blaKPC, blaOXA). Se utilizó papel de filtro como soporte sólido, el cual se cortó en cuadrados de 15×15 mm. Cada tira se impregnó con 50 µL de diferentes soluciones (i)control,(ii)imipenem/cilastatina(6mg/ml), (iii)imipenem/piperacilina-tazobactam (8 mg/ml), (iv)imipenem/EDTA(0,003 M) . A continuación, se aplicó una ansada de 10µL de cada cepa, previamente cultivada en agar sangre de carnero a 37°C durante 24 hs, sobre los soportes.Se dejó incubar a temperatura ambiente y se leyeron los resultados a los 5 min. Los ensayos fueron interpretados de las siguiente manera:(i) Aislados que generan cambio de color de rojo a amarillo en presencia de IMI e IMI/PTZ, se interpretaron como MBL. (ii)Si se produce en presencia IMI e IMI/EDTA, como KPC. (iii)De lo contrario, si son virados los tres soporte (IMI, IMI/ PTZ e IMI/ EDTA), se trata de una PDC.
Discusión / Conclusiones:
La técnica modificada de Carba NP en soporte sólido demostró ser eficaz y práctica para discriminar entre MBL, KPC y doble carbapenemasas. Es económica comparado con técnicas molecular/inmunocromatográficas y rápidas respecto a otras basadas en el mismo fundamento. Todo esto, no permitiría orientar tratamientos y antibióticos a ensayar rápidamente . No obstante, se requiere investigaciones adicionales que involucren un mayor número de cepas, distintas combinaciones de mecanismo y aislados de otras instituciones, para que pueda aplicarse en la detección rutinaria de carbapenemasas.
