Introducción:
RAPIDEC® CARBA NP BioMérieux (CNP) es un ensayo colorimétrico para la detección de producción de carbapenemasas (CBP) de tipo KPC, NDM, IMP, VIM y OXA (sin distinción), a partir de colonias bacterianas puras de Enterobacterales (ETB), P. aeruginosa (PAE) y A. baumannii (ABA). Es un método rápido que permite confirmar el diagnóstico de CBP entre 30 minutos y 2 horas, y contribuye a orientar el tratamiento del paciente crítico. El proceso de verificación analítica consiste en evaluar el desempeño del método para demostrar que cumple con los requisitos especificados por el fabricante.
Objetivos:
Verificar criterios aceptables de sensibilidad (SE), especificidad (ES), precisión (PR) y reproducibilidad (RE) del CNP para su uso diagnóstico en la detección de CBP en ETB, PAE y ABA.
Materiales y métodos:
El método se evaluó con una colección de 24 cepas de referencia previamente caracterizadas a nivel fenotípico y molecular, procedentes del AR-BANK de CDC y el repositorio del Servicio Antimicrobianos del INEI-ANLIS Malbrán (LNR): 10 K. pneumoniae (KPC-2, KPC-3, VIM-1, VIM-27, OXA-181, OXA-163, IMP-4, NDM-1+OXA-232, 2 negativas para CBP), 5 PAE (VIM-2, VIM-4, IMP-1, IMP-26, KPC-2), 4 E. coli (KPC-4, NDM-1, 2 negativas para CBP), 2 ABA (NDM-1, OXA-23+OXA-24), 1 E. aerogenes (OXA-48), 1 E. cloacae (KPC-3), y 1 M. morganii (NDM-1). Las variantes de CBP fueron caracterizadas por PCR y secuenciación de Sanger y/o WGS. El Blue Carba Test desarrollado en el LNR (BCT-LNR) fue usado como método de referencia y comparador del CNP. Los ensayos se realizaron siguiendo las indicaciones del fabricante. Se consideraron aceptables valores de SE, ES, PR y RE >=95%.
Resultados:
Se obtuvieron los siguientes resultados: 95% de SE, 100% de ES y 96% de PR. La RE con 3 operadores fue de 100%. De los 20 aislamientos con CBP, 13 fueron positivos previo a los 30 minutos de lectura (3 NDM-1, 2 KPC-2, 2 KPC-3, VIM-1, VIM-27, IMP-1, IMP-4, IMP-26, NDM-1+OXA-232), y 5 entre los 30 y 60 minutos (KPC-4, OXA-48, VIM-2, VIM-4, OXA-23+OXA-24). OXA-163 arrojó un resultado negativo por CNP, como así también por el método de referencia, debido a su baja actividad hidrolítica sobre carbapenemes, y fue considerado como verdadero negativo. OXA-181 fue detectada por BCT-LNR y no por CNP, por lo que se consideró como un falso negativo.
Discusión / Conclusiones:
El CNP presentó muy buen desempeño frente a un panel variado de bacilos Gram negativos productores de CBP con valores >=95% de SE, ES, PR y RE. Su uso en el laboratorio clínico permite la detección de la resistencia mediada por CBP, lo cual es esencial para implementar medidas de control de infecciones y orientar debidamente la terapia antimicrobiana.
